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      產(chǎn)品名稱:重組人骨形態(tài)發(fā)生蛋白15,His-標簽BMP-15

      產(chǎn)品特點:重組人骨形態(tài)發(fā)生蛋白15,His-標簽BMP-15的相關(guān)產(chǎn)品:Gelsolin 凝溶膠蛋白抗原 0.5mgGelsolin 凝溶膠蛋白抗原
      FCGR2B Protein Human 重組人 CD32b / FCGR2B 蛋白 (His 標簽)
      CHODL重組大鼠 CHODL / Chondrolectin 蛋白 ProteinBLMH Protein Mouse 重組小鼠 BLMH / Ble

      產(chǎn)品型號:

      更新日期:2024-11-19

      訪問次數(shù):219

      重組人骨形態(tài)發(fā)生蛋白15,His-標簽BMP-15的詳細資料:

      產(chǎn)品僅供研究使用,不適用于人類或臨床診斷
      商品屬性:

      產(chǎn)品英文名稱:Human BMP-15 Protein, His tag

      產(chǎn)品中文名稱:重組人骨形態(tài)發(fā)生蛋白15,His-標簽BMP-15

      規(guī)格:5 μg/20 μg/100 μg/1 mg

      貨號:EY-01X8701
      用途:僅供科研研究實驗

      特點&優(yōu)勢:

      表達宿主:大腸桿菌

      種屬:

      序列:氨基酸序列來源于:人BMP15 (Gln268-Arg392) (O95972) 表達的蛋白片段。

      活性:Testing in progress.

      蛋白長度:重組人GDF7129個氨基酸組成,預(yù)測分子量為14.2 KD

      純度:> 98% ,使用SDS-PAGE檢測

      通過LAL法測定,每微克蛋白里內(nèi)毒素含量<0.1 EU

      產(chǎn)品形式:凍干粉,凍干緩沖液為無菌的20 mM Tris50 mM NaClpH 8.0

      基因ID:9210

      使用中注意事項:開蓋使用前,請動?動

      背景

      Bone morphogenetic protein 15 (BMP-15), also known as GDF-9B, is a TGF-β superfamily ligand that is expressed by oocytes throughout folliculogenesis, and plays an important role in oocyte development. BMP-15 promotes the FSH-independent proliferation of ovarian granulosa cells (GC) and induces GC glycolysis and cholesterol synthesis. It also induces GC production of stem cell factor which, in turn, negatively regulates BMP-15 expression in oocytes. BMP-15 blocks the FS-induced GC expression of FSH R and multiple steroidogenic molecules.

      重組人骨形態(tài)發(fā)生蛋白15,His-標簽BMP-15

      本產(chǎn)品具有下列特點:

       1.操作簡便、快捷。可直接加入到檢測平板。在96-孔板中檢測時,無需洗滌或收獲細胞,免去溶解步驟。

      2. 無放射性。不需要配制液閃混合物,也不需要處理廢棄物。

      3. 與MTT相比,使用更安全。不需要使用揮發(fā)性的有機溶劑來溶解甲臜產(chǎn)物。

      4. 操作靈活,與MTT不同,平板讀數(shù)后可放回溫箱繼續(xù)孵育,使顏色進一步生成。

      操作步驟:

      (一)獲得目的基因

      1、通過PCR方法:以含目的基因的克隆質(zhì)粒為模板,按基因序列設(shè)計一對引物(在上游和下游引物分別引入不同的酶切位點),PCR循環(huán)獲得所需基因片段。

      2、通過RT-PCR方法:用TRIzol法從細胞或組織中提取總RNA,以mRNA為模板,逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA第一鏈,以逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為模板進行PCR循環(huán)獲得產(chǎn)物。

      (二)構(gòu)建重組表達載體

      1、載體酶切:將表達質(zhì)粒用限制性內(nèi)切酶(同引物的酶切位點)進行雙酶切,酶切產(chǎn)物行瓊脂糖電泳后,用膠回收Kit或凍融法回收載體大片段。

      2、PCR產(chǎn)物雙酶切后回收,在T4DNA連接酶作用下連接入載體。

      (三)  獲得含重組表達質(zhì)粒的表達菌種

      1、 將連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5α,根據(jù)重組載體的標志(抗Amp或藍白斑)作篩選,挑取單斑,堿裂解法小量抽提質(zhì)粒,雙酶切初步鑒定。

      2、 測序驗證目的基因的插入方向及閱讀框架均正確,進入下步操作。否則應(yīng)篩選更多克隆,重復(fù)亞克隆或亞克隆至不同酶切位點。

      3、 以此重組質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)化表達宿主菌的感受態(tài)細胞。

      (四)誘導(dǎo)表達

      1、挑取含重組質(zhì)粒的菌體單斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃過夜培養(yǎng)。

      2、按1∶50比例稀釋過夜菌,一般將1ml菌加入到含50mlLB培養(yǎng)基的300ml培養(yǎng)瓶中, 37℃震蕩培養(yǎng)至OD600≌0.4-1.0(*0.6,大約需3hr)。

      3、取部分液體作為未誘導(dǎo)的對照組,余下的加入IPTG誘導(dǎo)劑至終濃度0.4mM作為實驗組,兩組繼續(xù)37℃震蕩培養(yǎng)3hr。

      4、分別取菌體1ml, 離心12000g×30s收獲沉淀,用100μl 1%SDS重懸,混勻, 70℃10min。

      5、離心12000g×1min,取上清作為樣品,可做SDS-PAGE等分析。

      公司正在出售的產(chǎn)品:


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      CAP2(Adenylyl cyclase-associated protein 2 0.5mgCAP2(Adenylyl cyclase-associated protein 2) 環(huán)化酶相關(guān)蛋白CAP-2抗原

      TYRP1重組人 TRP1 / TYRP1 蛋白 Protein

      HRAS Protein Human 重組人 HRAS / GTPase Hras 蛋白

      PROM1 Protein Rat 重組大鼠 CD133 / PROM1 / Prominin 1 蛋白 (Fc 標簽)


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