產(chǎn)品僅供研究使用，不適用于人類或臨床診斷
商品屬性：

產(chǎn)品英文名稱：Mouse β-NGF protein

產(chǎn)品中文名稱：重組小鼠神經(jīng)生長(zhǎng)因子-β（β-NGF）

規(guī)格：5 μg/20 μg/100 μg/1 mg

貨號(hào)：EY-01X8690
用途：僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

特點(diǎn)&優(yōu)勢(shì):

標(biāo)簽:無(wú)標(biāo)簽

表達(dá)宿主:大腸桿菌

種屬:小鼠

序列:氨基酸序列來(lái)源于小鼠源：β-NGF 蛋白（P01139）（Met121-Gly241）表達(dá)的蛋白片段，在C-末端帶有 6×His 標(biāo)記。

活性:以其誘導(dǎo) TF-1 細(xì)胞增殖的能力來(lái)衡量。這種效應(yīng)的ED50<1ng/mL。重組小鼠beta-NGF 的特異性活性:> 1 x 10? IU/mg。

蛋白長(zhǎng)度：該蛋白質(zhì)的計(jì)算分子量為 14.41 kDa，在還原條件下，蛋白質(zhì)遷移為 11-17 kDa（SDS-PAGE 分析）。

純度:> 98 % ，使用SDS-動(dòng)?動(dòng)

背景

β-神經(jīng)生長(zhǎng)因子（Beta-NGF）是一種 27 kDa 的細(xì)胞因子，含有 241 個(gè)氨基酸殘基。β-NGF屬于神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)素家族，是一種神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子。它由α、β、γ亞單位組成，其中β亞單位與其生物活性:有關(guān)。β-NGF與p75神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)素受體和Trk受體結(jié)合，它們的功能分別是細(xì)胞死亡和存活。

本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):

 1.操作簡(jiǎn)便、快捷。可直接加入到檢測(cè)平板。在96-孔板中檢測(cè)時(shí),無(wú)需洗滌或收獲細(xì)胞,免去溶解步驟。

2. 無(wú)放射性。不需要配制液閃混合物,也不需要處理廢棄物。

3. 與MTT相比,使用更安全。不需要使用揮發(fā)性的有機(jī)溶劑來(lái)溶解甲臜產(chǎn)物。

4. 操作靈活,與MTT不同,平板讀數(shù)后可放回溫箱繼續(xù)孵育,使顏色進(jìn)一步生成。
公司正在出售的產(chǎn)品：

bovine Insulin protein 牛胰島素蛋白 10mgbovine Insulin protein 牛胰島素蛋白

GOLM1 Protein Human 重組人 GOLM1 / GP73 蛋白

THSD1重組小鼠 THSD1 / TMTSP 蛋白 Protein

MBL1 Protein Rat 重組大鼠 MBL1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

BMPR1B重組人 BMPR1B / ALK-6 (149-502) 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

小鼠八聚體結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子4(OCT4)檢測(cè)試劑盒 96T/48T

Rat epinephrine (EPI) ELISA Kit 大鼠(EPI)檢測(cè)試劑盒

Humanbonealkalinephosphatase,BALPELISAKit 人骨堿性0酸酶(BALP)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humancatecholamine,CA檢測(cè)試劑盒人兒茶酚胺(CA)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

轉(zhuǎn)基因油菜(canola)HCN92品系試劑盒20次

humansimilaoRIKENcDNA2610307008geneELISAKit人類似RIKENcDNA2610307008基因檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

兔子補(bǔ)體片斷3a(C3a)檢測(cè)試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

兔子補(bǔ)體蛋白4(C4)檢測(cè)試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

兔子表皮生長(zhǎng)因子(EGF)檢測(cè)試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

兔子白血病抑制因子受體(LIFR)檢測(cè)試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠白三烯E4(LTE4)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： LTE4 ELISA Kit

Mouse beta glucosidase (beta -glucosidase) ELISA Kit 小鼠β葡糖苷酶(β-glucosidase)檢測(cè)試劑盒

ELISA 小鼠胃泌素(mouse Gasin)  進(jìn)口分裝

CLIAKitforIRF(HumanierferoegulatoryFactor)ELISAKit人干擾素調(diào)節(jié)因子

通用型番茄瘡痂病辣椒斑點(diǎn)病菌(Xahomonascampesispv.vesicatoria;Xcv)試劑盒20次

NGAL大鼠中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白

重組小鼠神經(jīng)生長(zhǎng)因子-β（β-NGF）MEP1A重組小鼠 MEP1A 蛋白 Protein

CCP peptide (cyclic citrullinated peptide,CCP 0.5mgCCP peptide (cyclic citrullinated peptide,CCP) 瓜環(huán)肽

UBE2D4重組人 UBE2D4 蛋白 Protein

GOLM1 Protein Human 重組人 GOLM1 / GP73 蛋白

TGFB1 Protein Rat 重組大鼠 Latent TGF-beta 1 / TGFB1 蛋白

操作步驟：

(一)獲得目的基因

1、通過(guò)PCR方法:以含目的基因的克隆質(zhì)粒為模板,按基因序列設(shè)計(jì)一對(duì)引物(在上游和下游引物分別引入不同的酶切位點(diǎn)),PCR循環(huán)獲得所需基因片段。

2、通過(guò)RT-PCR方法:用TRIzol法從細(xì)胞或組織中提取總RNA,以mRNA為模板,逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA第一鏈,以逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為模板進(jìn)行PCR循環(huán)獲得產(chǎn)物。

(二)構(gòu)建重組表達(dá)載體

1、載體酶切:將表達(dá)質(zhì)粒用限制性內(nèi)切酶(同引物的酶切位點(diǎn))進(jìn)行雙酶切,酶切產(chǎn)物行瓊脂糖電泳后,用膠回收Kit或凍融法回收載體大片段。

2、PCR產(chǎn)物雙酶切后回收,在T4DNA連接酶作用下連接入載體。

(三)  獲得含重組表達(dá)質(zhì)粒的表達(dá)菌種

1、 將連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5α,根據(jù)重組載體的標(biāo)志(抗Amp或藍(lán)白斑)作篩選,挑取單斑,堿裂解法小量抽提質(zhì)粒,雙酶切初步鑒定。

2、 測(cè)序驗(yàn)證目的基因的插入方向及閱讀框架均正確,進(jìn)入下步操作。否則應(yīng)篩選更多克隆,重復(fù)亞克隆或亞克隆至不同酶切位點(diǎn)。

3、 以此重組質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)化表達(dá)宿主菌的感受態(tài)細(xì)胞。

(四)誘導(dǎo)表達(dá)

1、挑取含重組質(zhì)粒的菌體單斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃過(guò)夜培養(yǎng)。

2、按1∶50比例稀釋過(guò)夜菌,一般將1ml菌加入到含50mlLB培養(yǎng)基的300ml培養(yǎng)瓶中, 37℃震蕩培養(yǎng)至OD600≌0.4-1.0(*0.6,大約需3hr)。

3、取部分液體作為未誘導(dǎo)的對(duì)照組,余下的加入IPTG誘導(dǎo)劑至終濃度0.4mM作為實(shí)驗(yàn)組,兩組繼續(xù)37℃震蕩培養(yǎng)3hr。

4、分別取菌體1ml, 離心12000g×30s收獲沉淀,用100μl 1%SDS重懸,混勻, 70℃10min。

5、離心12000g×1min,取上清作為樣品,可做SDS-PAGE等分析。