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      產(chǎn)品名稱:HUVEC(原代)細(xì)胞,人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞

      產(chǎn)品特點(diǎn):HUVEC(原代)細(xì)胞,人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞供應(yīng)商上海一研生物相關(guān)內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素/前B細(xì)胞克隆增強(qiáng)因子1抗體 英文名稱:PBEF1 0.1ml

      內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素/前B細(xì)胞克隆增強(qiáng)因子1抗體 英文名稱:PBEF 0.1ml

      玻璃粘連蛋白抗體 英文名稱:Vitronectin 0.1ml

      血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子A抗體 英文名稱:VEGF-A 0.1ml

      VAMP1囊泡相關(guān)膜蛋白1抗體 英文名

      產(chǎn)品型號(hào):

      更新日期:2021-03-23

      訪問次數(shù):958

      HUVEC(原代)細(xì)胞,人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞的詳細(xì)資料:

      培養(yǎng)操作步驟
      1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布; 
      2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片); 
      3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí); 
      4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中; 
      5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。 

      下列是產(chǎn)品的訂購(gòu)信息:

      產(chǎn)品名稱

      HUVEC(原代)細(xì)胞,人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞供應(yīng)商

      英文名稱

      HUVEC (primary) cells, human umbilical vein endothelial cells

      貨號(hào)

      EY-X63973

      細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn):
      1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
      在實(shí)驗(yàn)過程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
      2.研究條件可以人為控制
      pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制,同時(shí),可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
      3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
      通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,需要時(shí),可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
      4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
      采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。
      ?
      實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
      1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法; 
      2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 
      3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕; 
      4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率; 
      5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

      細(xì)胞培養(yǎng)方法:
      1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
      ①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
      ②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個(gè)瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
      ③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
      ④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
      ⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
      ⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
      2、細(xì)胞復(fù)蘇:
      ①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時(shí)間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
      ②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
      3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
      ①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
      ②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;
      ③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;
      ④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。

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      HUVEC(原代)細(xì)胞,人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞供應(yīng)商Alexa Fluor 555標(biāo)記的羊抗大鼠IgGGoat Anti-rat IgG/Alexa Fluor 555 0.1ml

      Alexa Fluor 647標(biāo)記的羊抗大鼠IgGGoat Anti-rat IgG/Alexa Fluor 647 0.1ml

      辣根過氧化物酶標(biāo)記的羊抗豚鼠IgGGoat Anti-Guinea pig IgG/HRP 0.1ml

      標(biāo)記的羊抗豚鼠IgGGoat Anti-Guinea pig IgG/Bio 0.1ml

      Cy5標(biāo)記的羊抗豚鼠IgGGoat Anti-Guinea pig IgG/Cy5 0.1ml

      Cy7標(biāo)記的羊抗豚鼠IgGGoat Anti-Guinea pig IgG/Cy7 0.1ml

      Cy5.5標(biāo)記的羊抗豚鼠IgGGoat Anti-Guinea pig IgG/Cy5.5 0.1ml

      PE標(biāo)記的羊抗豚鼠IgGGoat Anti-Guinea pig IgG/PE 0.1ml

      PE-Cy3標(biāo)記的羊抗豚鼠IgGGoat Anti-Guinea pig IgG/PE-Cy3 0.1ml

      PE-CY5標(biāo)記的羊抗豚鼠IgGGoat Anti-Guinea pig IgG/PE-CY5 0.1ml

      APC標(biāo)記的羊抗豚鼠IgGGoat Anti-Guinea pig IgG/APC 0.1ml

       

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