① 組織塊培養法

組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

② 消化培養法

③ 懸浮細胞培養法

對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。

④器官培養

器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。

產品名稱：小鼠食管平滑肌細胞

英文名稱：Mouse Esophageal Smooth Muscle Cells

組織來源：食管組織

產品規格：5×105cells/T25細胞培養瓶

小鼠食管平滑肌分離自食管組織；食管可分為頸段、胸段和腹段，脊椎動物食管的頸段位于氣管背后和脊柱前端，胸段位于左、右肺之間的縱膈內，胸段通過膈孔與腹腔內腹相連，腹段很短與胃相連。哺乳動物的食管結構上由內向外分四層：黏膜層、黏膜下層、肌層和外膜。其中，肌層上1/3段為骨骼肌，下1/3為平滑肌，中段為骨骼肌和平滑肌混合組成。其中，肌纖維的排列方式分為內環形和外縱形兩層。食管的蠕動是由食管平滑肌收縮嚴格控制，食管還有括約肌，位于環狀軟骨水平的，稱為食管上括約肌；位于食管下端，一部分在膈上，穿過膈孔，另一部分在膈下的高壓帶，稱為食管下括約肌。食管平滑肌細胞原代分離培養3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態大小不一，呈梭形、不規則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態學特征和生長特點。

公司實驗室分離的小鼠食管平滑肌采用-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

公司實驗室分離的小鼠食管平滑肌經α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳3代左右

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

取材→分離→培養和維持

1、取材

人和動物細胞的取材是原代細胞培養成功的首要條件，直接影響細胞的體外培養。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應嚴格無菌

③ 防止機械損傷

④ 去除無用組織和避免干燥

⑤ 應注意組織類型、分化程度、年齡等

⑥ 作好記錄

2、分離

人或動物體內(或胚胎組織)由于多種細胞結合緊密，不利于各個細胞在體外培養中生長繁殖，必須將現有的組織塊充分散開，使細胞解離出來。

(1)懸浮細胞的分離方法

組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據需要收獲目的細胞。

(2)實體組織材料的分離方法

對于實體組織材料，由于細胞間結合緊密，為了使組織中的細胞充分分散，形成細胞懸液，可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法。

① 機械分散法

特點:簡便、快速,但對組織機械損傷大，而且細胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀)，應用酶的生化作用和非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結構松動，使團塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時再采用機械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細胞團塊得以較充分的分散，制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液，接種培養后，細胞容易貼壁生長。

血管內皮生長因子A   英文名稱：   vascuiar endothelial growth factor A   規格：      英文縮寫：   VEGF-A

血管內皮生長因子C   英文名稱：   vascuiar endothelial growth factor C   規格：      英文縮寫：   VEGF-C

血管內皮生長因子D   英文名稱：   vascuiar endothelial growth factor D   規格：      英文縮寫：   VEGF-D

血管內皮生長因子165   英文名稱：   vascuiar endothelial growth factor 165   規格：      英文縮寫：   VEGF165

小鼠幽門螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human granzyme A (Gzms-A) ELISA Kit 人顆粒酶A(Gzms-A)試劑盒

Humaelaxin,RLNELISAKit 人松弛肽/松弛素(RLN)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitfor6-OHDA(Human6-hydroxydopamine)ELISAKit人6-羥多巴胺

銀染法組織端粒酶活性AP電泳分析試劑盒10次

MouseMelatonin,MTELISAKit小鼠褪黑素(MT)試劑盒規格：96T/48T

HA重組甲型流感 H1N1 (A/Ohio/UR06-0091/2007) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein

Shiga-like toxin IIe variant subunit A 0139[Escherichia coli 0139] 大腸桿菌志賀樣毒素Ⅱ型突變體(O139菌型 0.5mgShiga-like toxin IIe variant subunit A 0139[Escherichia coli 0139] 大腸桿菌志賀樣毒素Ⅱ型突變體(O139菌型)

REG3A重組人 REG3A / HIP 蛋白 Protein

CCL28 Protein Human 重組人 CCL28 蛋白

IL6R Protein Human 重組人 IL6R / CD126 蛋白

Shiga-like toxin IIe variant subunit A 0139[Escherichia coli 0139] 大腸桿菌志賀樣毒素Ⅱ型突變體(O139菌型 0.5mgShiga-like toxin IIe variant subunit A 0139[Escherichia coli 0139] 大腸桿菌志賀樣毒素Ⅱ型突變體(O139菌型)

CCL28 Protein Human 重組人 CCL28 蛋白

HA重組甲型流感 H1N1 (A/Ohio/UR06-0091/2007) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein

IL6R Protein Human 重組人 IL6R / CD126 蛋白

REG3A重組人 REG3A / HIP 蛋白 Protein

小鼠食管平滑肌細胞大鼠多巴胺轉運蛋白(DAT)試劑盒 ，英文名： DAT ELISA Kit

Porcine noradrenaline (NE) ELISA Kit 豬去甲(NE)試劑盒

蝦特定基因序列(FC)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforLXA4(HumanLipoxinA4)ELISAKit人脂氧素A4

體液總抗氧化能力(TAC)比色法(ABTS)定量試劑盒50次

ELISAKitVEGF雞血管內皮細胞生長因子

視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。

1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養,如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。

T-25培養瓶充滿培養基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態,如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。

本公司的所有產品僅用于科學研究或者工業科研等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用