① 組織塊培養(yǎng)法

組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。

② 消化培養(yǎng)法

③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

④器官培養(yǎng)

器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

產(chǎn)品名稱：兔全骨髓細(xì)胞

英文名稱：Rabbit Whole Bone Marrow Cells

組織來源：骨髓

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

兔全骨髓分離自骨髓；骨髓是機(jī)體的造血組織，位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動(dòng)物的骨髓分兩種：紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細(xì)胞、血小板和各種白細(xì)胞。血小板有止血作用，白細(xì)胞能殺滅與抑制各種病原體，包括細(xì)菌、病毒等；某些淋巴細(xì)胞能制造抗體。因此，骨髓不但是造血器官，它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長(zhǎng)骨（如肱骨、股骨）的骨髓腔和扁平骨（如髂骨）的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中，是一種海綿狀的組織，能產(chǎn)生血細(xì)胞的骨髓略呈紅色，稱為紅骨髓。出生時(shí)，紅骨髓充滿全身骨髓腔，隨著年齡增大，脂肪細(xì)胞增多，相當(dāng)部分紅骨髓被黃骨髓取代，后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。全骨髓細(xì)胞即骨髓內(nèi)除紅細(xì)胞外的全部細(xì)胞。

實(shí)驗(yàn)室分離的兔全骨髓采用沖洗骨髓、紅細(xì)胞裂解法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)

實(shí)驗(yàn)室分離的兔全骨髓經(jīng)過檢測(cè)，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)基：含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性：懸浮

細(xì)胞形態(tài)：圓形

傳代特性：不增殖；不傳代

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

兔全骨髓體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

取材→分離→培養(yǎng)和維持

1、取材

人和動(dòng)物細(xì)胞的取材是原代細(xì)胞培養(yǎng)成功的首要條件，直接影響細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應(yīng)嚴(yán)格無菌

③ 防止機(jī)械損傷

④ 去除無用組織和避免干燥

⑤ 應(yīng)注意組織類型、分化程度、年齡等

⑥ 作好記錄

2、分離

人或動(dòng)物體內(nèi)(或胚胎組織)由于多種細(xì)胞結(jié)合緊密，不利于各個(gè)細(xì)胞在體外培養(yǎng)中生長(zhǎng)繁殖，必須將現(xiàn)有的組織塊充分散開，使細(xì)胞解離出來。

(1)懸浮細(xì)胞的分離方法

組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細(xì)胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細(xì)胞。

(2)實(shí)體組織材料的分離方法

對(duì)于實(shí)體組織材料，由于細(xì)胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細(xì)胞充分分散，形成細(xì)胞懸液，可采用機(jī)械分散法(物理裂解)和消化分離法。

① 機(jī)械分散法

特點(diǎn):簡(jiǎn)便、快速,但對(duì)組織機(jī)械損傷大，而且細(xì)胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團(tuán)塊(或糊狀)，應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進(jìn)一步使細(xì)胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動(dòng)，使團(tuán)塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時(shí)再采用機(jī)械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細(xì)胞團(tuán)塊得以較充分的分散，制成少量細(xì)胞群團(tuán)和大量單個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞懸液，接種培養(yǎng)后，細(xì)胞容易貼壁生長(zhǎng)。

小鼠(HYD)ELISA 試劑盒

Human urinary free coisol (UFC) ELISA Kit 人尿游離(UFC)檢測(cè)試劑盒

HumanMyosinlightChain,MLCELISAKit 人肌球蛋白輕鏈(MLC)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

GuineapigovalbuminspecificIgG,OVAsIgG檢測(cè)試劑盒豚鼠卵清蛋白特異性IgG(OVAsIgG)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

真菌/酵母細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激活性氧(ROS)初級(jí)綠色熒光測(cè)定試劑盒50次

Mousebonemorphogeneticproteins,BMPsELISAKit小鼠骨形成蛋白(BMPs)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

CD7重組大鼠 CD7 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

FSCN1 (Fascin 1 protein; fascin homolog 1, actin-bundling protein 0.5mgFSCN1 (Fascin 1 protein; fascin homolog 1, actin-bundling protein) 纖維束蛋白同源物1/肌動(dòng)蛋白集束蛋白/圓線蟲紫癜 抗原

SECTM1重組人 SECTM1 / K12 蛋白 Protein

IL36G Protein Human 重組人 IL36G / IL1F9 蛋白 (aa 18-169, His 標(biāo)簽)

P4HB Protein Mouse 重組小鼠 P4HB / ERBA2L 蛋白

FSCN1 (Fascin 1 protein; fascin homolog 1, actin-bundling protein 0.5mgFSCN1 (Fascin 1 protein; fascin homolog 1, actin-bundling protein) 纖維束蛋白同源物1/肌動(dòng)蛋白集束蛋白/圓線蟲紫癜 抗原

IL36G Protein Human 重組人 IL36G / IL1F9 蛋白 (aa 18-169, His 標(biāo)簽)

CD7重組大鼠 CD7 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

P4HB Protein Mouse 重組小鼠 P4HB / ERBA2L 蛋白

SECTM1重組人 SECTM1 / K12 蛋白 Protein

豚鼠單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： MCP-1/CCL2/MCAF ELISA Kit

Human dopachrome isomerase (DT) ELISA Kit 人多巴色素異構(gòu)酶(DT)檢測(cè)試劑盒

rabbitCollageypeⅢ,ColⅢELISAKIT 兔子Ⅲ型膠原(ColⅢ)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforBeta-Nph(MouseBeta-naphthol)ELISAKit小鼠β萘酚

細(xì)菌B1高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒20次

rabbitImmunoglobulinG,IgGELISAKit兔子免疫球蛋白G(IgG)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

兔全骨髓細(xì)胞人周期素依賴性激酶1(CDK1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒   Human CDK1 (Cyclin Depende Kinase 1) ELISA Kit

人周期素依賴性激酶2(CDK2)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒   Human CDK2 (Cyclin Depende Kinase 2) ELISA Kit

人周期素依賴性激酶4(CDK4)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒   Human CDK4 (Cyclin Depende Kinase 4) ELISA Kit

人周期素依賴性激酶5(CDK5)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒   Human CDK5 (Cyclin Depende Kinase 5) ELISA Kit

視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。

1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。

T-25培養(yǎng)瓶充滿培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。本公司的所有產(chǎn)品僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)科研等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用