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      產品名稱:人表皮角質形成細胞

      產品特點:人表皮角質形成細胞公司正在出售的產品Hela(人細胞) HT-29(人結腸癌細胞) 人胚胎眼鞏膜成纖維細胞;HFSF SK-MES-1細胞,人肺鱗癌細胞 狗腎細胞,MDCK細胞 CM-M066小鼠膀胱成纖維細胞培養基KIR2DL1 Others Human 人 KIR2DL1 / CD158a

      產品型號:

      更新日期:2024-12-11

      訪問次數:137

      人表皮角質形成細胞的詳細資料:

      人表皮角質形成細胞

      實驗報告:

      人表皮角質形成細胞
      一、分離與培養:

      1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大小;

      2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

      3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;

      4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

      5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;二、免疫熒光鑒定:

      1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

      2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

      3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

      4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

      5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

      6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

      細胞簡介:

      人表皮角質形成細胞

      人表皮角質形成分離自皮膚組織;表皮位于動物皮膚的外層,由胚胎時期外胚層形成,具有抗摩擦和抗損傷的作用。表皮是皮膚的淺層結構,由復層扁平上皮構成。從基底層到表面可分為五層,即基底層、棘層、顆粒層、透明層和角質層。表皮角質形成細胞是一種能合成角質蛋白的上皮細胞,此類細胞為表皮的主體,由表皮深層始逐漸增殖、分化,并在成為角化的角質細胞中,細胞核與細胞器消失,細胞亦失去生理功能而脫落。未脫落部分對機體尚有保護作用,故不必在洗擦身體時用力搓擦,使其過早脫失。表皮角質形成細胞主要分布于表皮基底層,在上皮程序性死亡后,細胞產生角化并移向表皮。體外培養的表皮角化細胞容易導致終末分化,不能充分增殖。角質形成細胞終產生角質蛋白,在其向角質細胞演變過程中,一般可以分為四層,即基底層、棘層、顆粒層以及角質層。有人把前三層或前二層稱為生發層或馬爾匹基層。此外,在某些部位,特別在掌跖部位,角質層下方還可見到透明層。

      產品名稱

      人表皮角質形成細胞

      組織來源

      皮膚組織

      英文名稱

      Human Epidermal   Keratinocyte Cells

      產品規格

      5×105cells/T25細胞培養瓶

       

      方法簡介:

      人表皮角質形成細胞

      公司實驗室分離的人表皮角質形成層先消化、后-膠原酶混合消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

      質量檢測

      公司實驗室分離的人表皮角質形成經PCK免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

      培養信息:

      人表皮角質形成細胞

      包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2

      培養基 含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

      換液頻率 每2-3天換液一次

      生長特性 貼壁

      細胞形態 上皮細胞樣

      傳代特性 可傳1-2

      消化液 0.25%

      培養條件 氣相:空氣,95%CO25%

      人表皮角質形成細胞

      注意事項:

      人表皮角質形成細胞
      1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養液是否有漏液、渾濁等現象,若有上述現象發生請及時和我們聯系。

      2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需細胞因子等,確保細胞培養條件一致,若由于培養條件不一致而導致細胞出現問題,責任由客戶自行承擔。

      3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題,部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正常現象。觀察好細胞狀態后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置4-6h。

      4. 貼壁細胞可以消化,懸浮細胞直接混勻收集細胞,900 rpm-1000 rpm離心3 min,棄上清。加5 mL PBS重懸細胞,再900 rpm-1000 rpm離心3 min,,用新鮮的*培養基重懸細胞,并接種到新的培養瓶或培養皿中,置于培養箱中進行培養。

      5. 請客戶用相同條件的培養基用于細胞培養。

      6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和我司技術部溝通交流。由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩定的情況,請及時和我們聯系,告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。

      7. 該細胞僅供科研使用。

      8. 備注:運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞,請換用按照說明書細胞培養條件新配制的*培養基來培養細胞。收到細胞后次傳代建議1:2傳代 。

      9.注意: 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。

      公司正在出售的產品:
      人表皮角質形成細胞

      小鼠內皮型合成酶3(eNOS-3)ELISA 試劑盒

      People of coicosterone / coicosterone (CO) ELISA Kit 人皮質酮/腎上腺酮(CO)檢測試劑盒

      HumanAcylationStimulatingProtein,ASPELISAKit 人酰化刺激蛋白(ASP)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

      Human8-isoprostaglandin,8-iso-PG檢測試劑盒人8異前列腺素(8-iso-PG)檢測試劑盒規格:96T/48T

      正常大鼠(SpragueDawley)腎組織微粒體組分(5毫克/毫升)500微升

      Mouseai-IgEreceptoraibodyELISAKit小鼠抗IgE受體抗體檢測試劑盒規格:96T/48T

      IL22RA1重組狗 IL22RA1 / IL22R 蛋白 Protein

      NGN3(neurogenin 3; Neurog3 0.5mgNGN3(neurogenin 3; Neurog3) 神經元素3抗原

      ADRBK1重組人 GRK2 / ADRBK1 蛋白 (His & GST 標簽) Protein

      CDH2 Protein Human 重組人 N-Cadherin / CD325 / CDH2 蛋白 (His & Fc 標簽)

      FABP4 Protein Mouse 重組小鼠 FABP4 / ALBP / A-FABP / AFABP 蛋白

      NGN3(neurogenin 3; Neurog3 0.5mgNGN3(neurogenin 3; Neurog3) 神經元素3抗原

      CDH2 Protein Human 重組人 N-Cadherin / CD325 / CDH2 蛋白 (His & Fc 標簽)

      IL22RA1重組狗 IL22RA1 / IL22R 蛋白 Protein

      FABP4 Protein Mouse 重組小鼠 FABP4 / ALBP / A-FABP / AFABP 蛋白

      ADRBK1重組人 GRK2 / ADRBK1 蛋白 (His & GST 標簽) Protein

      小鼠細胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA 試劑盒 96T/48T

      Human phosphorylated exacellular signal regulated kinase (pERK) ELISA Kit 0酸化細胞外信號調節激酶(pERK)檢測試劑盒

      HumanPancreaticLipase,PLELISAKit 人胰脂肪酶(PL)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

      ChickenIerferonα,IFN-α檢測試劑盒雞α干擾素(IFN-α)檢測試劑盒規格:96T/48T

      載玻片細胞DHPR受體蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20

      MouseGranulocyteColonyStimulatingFactor,G-CSFELISAKit小鼠粒細胞集落刺激因子(G-CSF)檢測試劑盒規格:96T/48T

      人表皮角質形成細胞小鼠心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

      小鼠腺病毒(ADV)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

      小鼠纖維蛋白肽BFPB)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

      小鼠纖溶抑制因子/激活的纖溶抑制物(TAFI)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝


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