產(chǎn)品僅供研究使用，不適用于人類或臨床診斷
商品屬性：

產(chǎn)品英文名稱：Rat FGF-1 Protein

產(chǎn)品中文名稱：重組大鼠酸性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子FGF-1

規(guī)格：5 0μg/20 μg/100 μg/1 mg

貨號(hào)：EY-01X8767
用途：僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

特點(diǎn)&優(yōu)勢(shì):

序列:氨基酸序列來(lái)源于：大鼠源FGF1 (P61149) (Phe16-Asp155) 表達(dá)的蛋白片段。

活性:Testing in Progress

蛋白長(zhǎng)度：重組大鼠FGF1 由140個(gè)氨基酸組成，預(yù)測(cè)分子量為15.9 KD。

純度:> 98 % ，使用SDS-PAGE檢測(cè)

通過(guò)LAL法測(cè)定，每微克蛋白里內(nèi)毒素含量<0.1 EU。

產(chǎn)品形式:凍干粉，凍干緩沖液為無(wú)菌的PBS，pH 6.5。

基因ID:25317

使用中注意事項(xiàng):開(kāi)蓋使用前，請(qǐng)先離心。本產(chǎn)品為凍干粉，推薦用該產(chǎn)品配套的Reconstit動(dòng)?動(dòng)

背景

FGF1 is one of 23 known members of the FGF family. Proteins of this family play a central role during prenatal development, postnatal growth and regeneration of a variety of tissues, by promoting cellular proliferation and differentiation. FGF1 is a non-glycosylated heparin binding growth factor that is expressed in the brain, kidney, retina, smooth muscle cells, bone matrix, osteoblasts, astrocytes and endothelial cells. FGF1 has the ability to signal through all the FGF receptors.

本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):

 1.操作簡(jiǎn)便、快捷。可直接加入到檢測(cè)平板。在96-孔板中檢測(cè)時(shí),無(wú)需洗滌或收獲細(xì)胞,免去溶解步驟。

2. 無(wú)放射性。不需要配制液閃混合物,也不需要處理廢棄物。

3. 與MTT相比,使用更安全。不需要使用揮發(fā)性的有機(jī)溶劑來(lái)溶解甲臜產(chǎn)物。

4. 操作靈活,與MTT不同,平板讀數(shù)后可放回溫箱繼續(xù)孵育,使顏色進(jìn)一步生成。

操作步驟：

(一)獲得目的基因

1、通過(guò)PCR方法:以含目的基因的克隆質(zhì)粒為模板,按基因序列設(shè)計(jì)一對(duì)引物(在上游和下游引物分別引入不同的酶切位點(diǎn)),PCR循環(huán)獲得所需基因片段。

2、通過(guò)RT-PCR方法:用TRIzol法從細(xì)胞或組織中提取總RNA,以mRNA為模板,逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA第一鏈,以逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為模板進(jìn)行PCR循環(huán)獲得產(chǎn)物。

(二)構(gòu)建重組表達(dá)載體

1、載體酶切:將表達(dá)質(zhì)粒用限制性內(nèi)切酶(同引物的酶切位點(diǎn))進(jìn)行雙酶切,酶切產(chǎn)物行瓊脂糖電泳后,用膠回收Kit或凍融法回收載體大片段。

2、PCR產(chǎn)物雙酶切后回收,在T4DNA連接酶作用下連接入載體。

(三)  獲得含重組表達(dá)質(zhì)粒的表達(dá)菌種

1、 將連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5α,根據(jù)重組載體的標(biāo)志(抗Amp或藍(lán)白斑)作篩選,挑取單斑,堿裂解法小量抽提質(zhì)粒,雙酶切初步鑒定。

2、 測(cè)序驗(yàn)證目的基因的插入方向及閱讀框架均正確,進(jìn)入下步操作。否則應(yīng)篩選更多克隆,重復(fù)亞克隆或亞克隆至不同酶切位點(diǎn)。

3、 以此重組質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)化表達(dá)宿主菌的感受態(tài)細(xì)胞。

(四)誘導(dǎo)表達(dá)

1、挑取含重組質(zhì)粒的菌體單斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃過(guò)夜培養(yǎng)。

2、按1∶50比例稀釋過(guò)夜菌,一般將1ml菌加入到含50mlLB培養(yǎng)基的300ml培養(yǎng)瓶中, 37℃震蕩培養(yǎng)至OD600≌0.4-1.0(*0.6,大約需3hr)。

3、取部分液體作為未誘導(dǎo)的對(duì)照組,余下的加入IPTG誘導(dǎo)劑至終濃度0.4mM作為實(shí)驗(yàn)組,兩組繼續(xù)37℃震蕩培養(yǎng)3hr。

4、分別取菌體1ml, 離心12000g×30s收獲沉淀,用100μl 1%SDS重懸,混勻, 70℃10min。

5、離心12000g×1min,取上清作為樣品,可做SDS-PAGE等分析。

公司正在出售的產(chǎn)品：

CD200受體1(CD200R1)重組蛋白 Recombinant CD200 Receptor 1 (CD200R1)

EPOR Protein Human 重組人 EPO Receptor / EPOR 蛋白

CA8重組小鼠 Carbonic Anhydrase VIII / Car8 蛋白 Protein

FCAR Protein Rat 重組大鼠 CD89 / FCAR 蛋白

IP6K1重組人 IHPK1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

小鼠肌肝(Cr)檢測(cè)試劑盒 組裝/原裝

Rat lymphocyte function associated aigen 3 (LFA-3/CD58) ELISA Kit 大鼠淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原3(LFA-3/CD58)檢測(cè)試劑盒

Humaetinolbindingprotein,RBPELISAKit 人結(jié)合蛋白(RBP)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanai-lymphocytotoxicaibody,ALA/LCA檢測(cè)試劑盒人抗淋巴細(xì)胞毒抗體(ALA/LCA)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物尿苷二0酸葡萄糖焦0酸化酶(UDPglucosepyrophosphorylase)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

Humanurokinase-typeplasminogenactivator，uPA/PLAUELISAKit人8(KLK8)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠白介素-2   英文名稱：    ierleukin-2   規(guī)格：      英文縮寫(xiě)：   IL-2

小鼠可溶性白介素-2受體   英文名稱：    soluble ierleukin-2 recepor   規(guī)格：      英文縮寫(xiě)：   sIL-2R

小鼠白介素-3   英文名稱：    ierleukin-3   規(guī)格：      英文縮寫(xiě)：   IL-3

小鼠白介素-4   英文名稱：    ierleukin-4   規(guī)格：      英文縮寫(xiě)：   IL-4

大鼠白介素5(IL-5)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： IL-5 ELISA Kit

Mouse ierleukin 1 soluble receptor I (IL-1sR I) ELISA Kit 小鼠白介素1可溶性受體Ⅰ(IL-1sRⅠ)檢測(cè)試劑盒

ELISA 小鼠肝生素(mouse HGF)  進(jìn)口分裝

CLIAKitforIns胰島素(間接法二步法)

通用型副氏菌B(SalmonellaParatyphiB)定量PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒20次

ELISAKitapo-B100大鼠載脂蛋白B100

重組大鼠酸性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子FGF-1CCL3重組小鼠 CCL3 / Mip1a 蛋白 Protein

脯氨酰羧肽酶(PRCP)重組蛋白 Recombinant Prolylcarboxypeptidase (PRCP)

CD3D & CD3E重組人 CD3D & CD3E Heterodimer 蛋白 Protein

EPOR Protein Human 重組人 EPO Receptor / EPOR 蛋白

SERPINC1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 SerpinC1 / AntithrombinIII / ATIII 蛋白