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      產品名稱:重組人轉化生長因子-β,His-標簽TGF-β

      產品特點:重組人轉化生長因子-β,His-標簽TGF-β的相關產品:GABA/KLH γ1氨基偶聯血藍蛋白 1mgGABA/KLH γ1氨基偶聯血藍蛋白
      IL36G Protein Human 重組人 IL36G / IL1F9 蛋白 (aa 18-169)
      IL1RN重組大鼠 IL-1RA / IL1RN 蛋白 (Fc 標簽) Protein

      產品型號:

      更新日期:2024-11-19

      訪問次數:171

      重組人轉化生長因子-β,His-標簽TGF-β的詳細資料:

      產品僅供研究使用,不適用于人類或臨床診斷
      商品屬性:

      產品英文名稱:Human TGF-β proteinHis tag

      產品中文名稱:重組人轉化生長因子-β,His-標簽TGF-β

      規格:5 μg/20 μg/100 μg/1 mg

      貨號:EY-01X8682
      用途:僅供科研研究實驗

      特點&優勢:

      標簽C-His

      表達宿主:大腸桿菌

      種屬:

      序列:氨基酸序列來源于人源:TGF-β1Met 278-Asn 390(P01137)表達的蛋白片段,在 C 端用 6×His 標記表達。

      活性:通過其抑制il -4誘導HT-2細胞增殖的能力來測定。這種效應的 ED?? <0.1 ng/mL。重組人 TGF beta 1 的特異性活性:約大于 5 x 10? IU/mg。以其誘導 MCF-7 細胞增殖的能力來衡量。該效應的 ED?? 值為 <3.2 ng/mL

      蛋白長度:該蛋白質的計算分子量為 13.7動?動

      背景

      轉化生長因子 betaTGF beta)家族的細胞因子無處不在,具有多種功能,對生存至關重要。它們在生長、發育、炎癥、修復和宿主免疫中發揮著核心作用。哺乳動物的 TGF beta 異構體(TGF beta 1beta 2 beta 3)作為潛在的前體分泌,擁有多種細胞表面受體,并產生至少兩種介導信號轉導的受體。

      重組人轉化生長因子-β,His-標簽TGF-β

      本產品具有下列特點:

       1.操作簡便、快捷。可直接加入到檢測平板。在96-孔板中檢測時,無需洗滌或收獲細胞,免去溶解步驟。

      2. 無放射性。不需要配制液閃混合物,也不需要處理廢棄物。

      3. 與MTT相比,使用更安全。不需要使用揮發性的有機溶劑來溶解甲臜產物。

      4. 操作靈活,與MTT不同,平板讀數后可放回溫箱繼續孵育,使顏色進一步生成。
      公司正在出售的產品:

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      RBP4重組小鼠 RBP4 蛋白 Protein

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      小鼠巨噬細胞游走抑制因子   英文名稱:   macrophage migration inhibitory factor   規格:      英文縮寫:   MIF

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      重組人轉化生長因子-β,His-標簽TGF-βRBP4重組小鼠 RBP4 蛋白 Protein

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      VDR重組人 VDR / NR1I1 蛋白 Protein

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      CLEC14A Protein Rat 重組大鼠 CLEC14A / EGFR-5 蛋白 (Fc 標簽)

      操作步驟:

      (一)獲得目的基因

      1、通過PCR方法:以含目的基因的克隆質粒為模板,按基因序列設計一對引物(在上游和下游引物分別引入不同的酶切位點),PCR循環獲得所需基因片段。

      2、通過RT-PCR方法:用TRIzol法從細胞或組織中提取總RNA,以mRNA為模板,逆轉錄形成cDNA第一鏈,以逆轉錄產物為模板進行PCR循環獲得產物。

      (二)構建重組表達載體

      1、載體酶切:將表達質粒用限制性內切酶(同引物的酶切位點)進行雙酶切,酶切產物行瓊脂糖電泳后,用膠回收Kit或凍融法回收載體大片段。

      2、PCR產物雙酶切后回收,在T4DNA連接酶作用下連接入載體。

      (三)  獲得含重組表達質粒的表達菌種

      1、 將連接產物轉化大腸桿菌DH5α,根據重組載體的標志(抗Amp或藍白斑)作篩選,挑取單斑,堿裂解法小量抽提質粒,雙酶切初步鑒定。

      2、 測序驗證目的基因的插入方向及閱讀框架均正確,進入下步操作。否則應篩選更多克隆,重復亞克隆或亞克隆至不同酶切位點。

      3、 以此重組質粒DNA轉化表達宿主菌的感受態細胞。

      (四)誘導表達

      1、挑取含重組質粒的菌體單斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃過夜培養。

      2、按1∶50比例稀釋過夜菌,一般將1ml菌加入到含50mlLB培養基的300ml培養瓶中, 37℃震蕩培養至OD600≌0.4-1.0(*0.6,大約需3hr)。

      3、取部分液體作為未誘導的對照組,余下的加入IPTG誘導劑至終濃度0.4mM作為實驗組,兩組繼續37℃震蕩培養3hr。

      4、分別取菌體1ml, 離心12000g×30s收獲沉淀,用100μl 1%SDS重懸,混勻, 70℃10min。

      5、離心12000g×1min,取上清作為樣品,可做SDS-PAGE等分析。


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