產(chǎn)品僅供研究使用，不適用于人類或臨床診斷
商品屬性：

產(chǎn)品英文名稱：Mouse IL-6 protein, His tag (Animal-Free)

產(chǎn)品中文名稱：重組小鼠白介素-6，His 標(biāo)簽無(wú)動(dòng)物源IL-6

規(guī)格：5 μg/20 μg/100μg

貨號(hào)：EY-01X8630
用途：僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

特點(diǎn)&優(yōu)勢(shì):

標(biāo)簽C-His

種屬:小鼠

序列:氨基酸序列來(lái)源于：鼠源 IL-6（P08505）（Met 1-Thr211）表達(dá)的蛋白片段，C端融合有多聚標(biāo)簽。

蛋白長(zhǎng)度：重組小鼠 IL-6由193個(gè)氨基酸組成，預(yù)測(cè)分子量為 21.9 KD。在還原性條件下的SDS-PAGE中，重組人CD274/PD-L1的分子量約為25 KD。

純度:> 98 % ，使用SDS-PAGE檢測(cè)

采用 LAL 法檢測(cè)，每 1 μg 蛋白質(zhì)中的 EU 含量小于 1.0。

產(chǎn)品形式:凍干粉，凍干緩沖液為無(wú)菌的 PBS，pH 7.4。

基動(dòng)?動(dòng)

背景

IL-6是急性期反應(yīng)的有效誘導(dǎo)劑。IL-6的快速產(chǎn)生有助于感染和組織損傷期間的宿主防御，但是IL-6合成過(guò)多與疾病病理學(xué)有關(guān)。在先天免疫應(yīng)答中，IL-6是通過(guò)感染或組織損傷部位的Toll樣受體（TLR）識(shí)別病原體后，由髓樣細(xì)胞（例如巨噬細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞）合成的。在適應(yīng)性免疫應(yīng)答中，IL-6是將B細(xì)胞分化為分泌免疫球蛋白的細(xì)胞（可能）是必需的。IL-6也在CD4+T細(xì)胞亞群的分化中起主要作用。IL-6是誘導(dǎo)生發(fā)中心形成所需的T濾泡輔助細(xì)胞（Tfh）發(fā)育的基本因素。IL-6與IL-21一起，可控制Tfh細(xì)胞的早期生成，對(duì)于有效的針對(duì)急性病毒感染的抗體反應(yīng)至關(guān)重要。通過(guò)樹突狀細(xì)胞的“簇信號(hào)"將原始CD4+T細(xì)胞驅(qū)動(dòng)到Th17譜系。骨髓瘤細(xì)胞的增殖和漿母細(xì)胞的存活也需要IL-6。

本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):

 1.操作簡(jiǎn)便、快捷。可直接加入到檢測(cè)平板。在96-孔板中檢測(cè)時(shí),無(wú)需洗滌或收獲細(xì)胞,免去溶解步驟。

2. 無(wú)放射性。不需要配制液閃混合物,也不需要處理廢棄物。

3. 與MTT相比,使用更安全。不需要使用揮發(fā)性的有機(jī)溶劑來(lái)溶解甲臜產(chǎn)物。

4. 操作靈活,與MTT不同,平板讀數(shù)后可放回溫箱繼續(xù)孵育,使顏色進(jìn)一步生成。
公司正在出售的產(chǎn)品：

APP695-770 (Amyloid protein precursor 0.5mgAPP695-770 (Amyloid protein precursor) 淀粉樣肽前體蛋白(多肽抗原)

ERN1 Protein Human 重組人 ERN1 / IRE1 蛋白 (aa 465-977, His & GST 標(biāo)簽)

EFNB1重組小鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白 Protein

CNTN3 Protein Rat 重組大鼠 Contactin 3 / CNTN3 蛋白

MS4A1重組人 CD20 / MS4A1 蛋白 (aa 213-297, His 標(biāo)簽) Protein

小鼠壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體1(AIL-R1)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human ai cardiolipin aibody IgG (ACA-IgG) ELISA Kit 人抗心0脂抗體IgG(ACA-IgG)檢測(cè)試劑盒

HumanAdenosinediphosphate,ADPELISAKit 人二0酸腺苷(ADP)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforACA(Humanai-cenolandcenosomeaibody)ELISAKit人抗中性粒/中心體抗體

一步法平端PCR反應(yīng)液50次

MouseOncostatin-M,OSMELISAKit小鼠抑瘤素M(OSM)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠白介素 -12 (mouse IL-12)   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   美國(guó) Biosource

小鼠白介素 -12(p40) (mouse IL-12 p40)   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   美國(guó) R&D

小鼠白介素 -12(p70) (mouse IL-12 p70)   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   奧地利 Bender

小鼠白介素 -13(p70) (mouse IL-13)   作用：   ELISA   規(guī)格：  動(dòng)?動(dòng)

大鼠卵白蛋白(OVA)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： OVA ELISA Kit

Mouse insulin like growth factor binding protein 4 (IGFBP-4) ELISA Kit 小鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白4(IGFBP-4)檢測(cè)試劑盒

RatHeatShockProteinglycoprotein96,HSPgp96ELISAKit 大鼠熱休克蛋白糖蛋白96(HSPgp96)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforGDI(HumanGuaninenucleotidedissociationInhibitor)ELISAKit人鳥苷酸解離抑制因子

細(xì)胞元素比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

RatsecretoryimmunoglobulinA,sIgAELISAKit大鼠分泌型免疫球蛋白A(sIgA)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

重組小鼠白介素-6，His 標(biāo)簽無(wú)動(dòng)物源IL-6SMPD1重組小鼠 SMPD1 / ASM 蛋白 Protein

白介素1α(IL1α)重組蛋白 Recombinant Interleukin 1 Alpha (IL1a)

CPNE1重組人 CPNE1 / Copine I / CPN1 蛋白 Protein

ERN1 Protein Human 重組人 ERN1 / IRE1 蛋白 (aa 465-977, His & GST 標(biāo)簽)

IFNAR1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IFNAR1 / IFNAR 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

操作步驟：

(一)獲得目的基因

1、通過(guò)PCR方法:以含目的基因的克隆質(zhì)粒為模板,按基因序列設(shè)計(jì)一對(duì)引物(在上游和下游引物分別引入不同的酶切位點(diǎn)),PCR循環(huán)獲得所需基因片段。

2、通過(guò)RT-PCR方法:用TRIzol法從細(xì)胞或組織中提取總RNA,以mRNA為模板,逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA第一鏈,以逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為模板進(jìn)行PCR循環(huán)獲得產(chǎn)物。

(二)構(gòu)建重組表達(dá)載體

1、載體酶切:將表達(dá)質(zhì)粒用限制性內(nèi)切酶(同引物的酶切位點(diǎn))進(jìn)行雙酶切,酶切產(chǎn)物行瓊脂糖電泳后,用膠回收Kit或凍融法回收載體大片段。

2、PCR產(chǎn)物雙酶切后回收,在T4DNA連接酶作用下連接入載體。

(三)  獲得含重組表達(dá)質(zhì)粒的表達(dá)菌種

1、 將連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5α,根據(jù)重組載體的標(biāo)志(抗Amp或藍(lán)白斑)作篩選,挑取單斑,堿裂解法小量抽提質(zhì)粒,雙酶切初步鑒定。

2、 測(cè)序驗(yàn)證目的基因的插入方向及閱讀框架均正確,進(jìn)入下步操作。否則應(yīng)篩選更多克隆,重復(fù)亞克隆或亞克隆至不同酶切位點(diǎn)。

3、 以此重組質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)化表達(dá)宿主菌的感受態(tài)細(xì)胞。

(四)誘導(dǎo)表達(dá)

1、挑取含重組質(zhì)粒的菌體單斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃過(guò)夜培養(yǎng)。

2、按1∶50比例稀釋過(guò)夜菌,一般將1ml菌加入到含50mlLB培養(yǎng)基的300ml培養(yǎng)瓶中, 37℃震蕩培養(yǎng)至OD600≌0.4-1.0(*0.6,大約需3hr)。

3、取部分液體作為未誘導(dǎo)的對(duì)照組,余下的加入IPTG誘導(dǎo)劑至終濃度0.4mM作為實(shí)驗(yàn)組,兩組繼續(xù)37℃震蕩培養(yǎng)3hr。

4、分別取菌體1ml, 離心12000g×30s收獲沉淀,用100μl 1%SDS重懸,混勻, 70℃10min。

5、離心12000g×1min,取上清作為樣品,可做SDS-PAGE等分析。