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      產(chǎn)品名稱:線粒體分離提取試劑盒(細(xì)胞樣品)

      產(chǎn)品特點(diǎn):線粒體分離提取試劑盒(細(xì)胞樣品)的相關(guān)產(chǎn)品:C-型凝集素域家族11成員A(CLEC11A)重組蛋白 Recombinant C-Type Lectin Domain Family 11, Member A (CLEC11A)
      FABP1 Protein Human 重組人 L-FABP / FABP1 蛋白

      產(chǎn)品型號(hào):

      更新日期:2024-11-19

      訪問次數(shù):505

      線粒體分離提取試劑盒(細(xì)胞樣品)的詳細(xì)資料:

      產(chǎn)品僅供研究使用,不適用于人類或臨床診斷
      商品屬性:

      產(chǎn)品英文名稱:Mitochondrion Extraction Kit (Cultured Cells)

      產(chǎn)品中文名稱:線粒體分離提取試劑盒(細(xì)胞樣品)

      規(guī)格:50 T/200 T

      貨號(hào):EY-01X8553
      用途:僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

      特點(diǎn)&優(yōu)勢(shì):

        無需1小時(shí),即可從2x10*7細(xì)胞中提取完整的線粒體。

        使用基于試劑的方法能夠同時(shí)處理多個(gè)樣品,或使用Dounce均質(zhì)化方法獲得盡可能高的產(chǎn)率。

        分離的線粒體幾乎與任何下游應(yīng)用兼容。

      保存建議:請(qǐng)參閱說明書中各個(gè)組分的存儲(chǔ)條件。自發(fā)貨之日起,在推薦溫度下至少穩(wěn)定12個(gè)月。

      運(yùn)輸條件:藍(lán)冰運(yùn)輸

      背景

      線粒體是一種雙膜結(jié)合的細(xì)胞器,存在于大多數(shù)真核細(xì)胞中。線粒體的功能是提供細(xì)胞能量。此外,線粒體參與其他任務(wù),如信號(hào)傳遞、細(xì)胞分化和細(xì)胞死亡,以及維持對(duì)細(xì)胞周期和細(xì)胞生長(zhǎng)的控制。線粒體與多種人類疾病有牽連,包括線粒體疾病、心臟疾病、心力衰竭和孤癥。線粒體可能在這些細(xì)胞過程中發(fā)揮重要作用。

      線粒體分離提取試劑盒(細(xì)胞樣品)

      本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):

       1.操作簡(jiǎn)便、快捷。可直接加入到檢測(cè)平板。在96-孔板中檢測(cè)時(shí),無需洗滌或收獲細(xì)胞,免去溶解步驟。

      2. 無放射性。不需要配制液閃混合物,也不需要處理廢棄物。

      3. 與MTT相比,使用更安全。不需要使用揮發(fā)性的有機(jī)溶劑來溶解甲臜產(chǎn)物。

      4. 操作靈活,與MTT不同,平板讀數(shù)后可放回溫箱繼續(xù)孵育,使顏色進(jìn)一步生成。

      操作步驟:

      (一)獲得目的基因

      1、通過PCR方法:以含目的基因的克隆質(zhì)粒為模板,按基因序列設(shè)計(jì)一對(duì)引物(在上游和下游引物分別引入不同的酶切位點(diǎn)),PCR循環(huán)獲得所需基因片段。

      2、通過RT-PCR方法:用TRIzol法從細(xì)胞或組織中提取總RNA,以mRNA為模板,逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA第一鏈,以逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為模板進(jìn)行PCR循環(huán)獲得產(chǎn)物。

      (二)構(gòu)建重組表達(dá)載體

      1、載體酶切:將表達(dá)質(zhì)粒用限制性內(nèi)切酶(同引物的酶切位點(diǎn))進(jìn)行雙酶切,酶切產(chǎn)物行瓊脂糖電泳后,用膠回收Kit或凍融法回收載體大片段。

      2、PCR產(chǎn)物雙酶切后回收,在T4DNA連接酶作用下連接入載體。

      (三)  獲得含重組表達(dá)質(zhì)粒的表達(dá)菌種

      1、 將連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5α,根據(jù)重組載體的標(biāo)志(抗Amp或藍(lán)白斑)作篩選,挑取單斑,堿裂解法小量抽提質(zhì)粒,雙酶切初步鑒定。

      2、 測(cè)序驗(yàn)證目的基因的插入方向及閱讀框架均正確,進(jìn)入下步操作。否則應(yīng)篩選更多克隆,重復(fù)亞克隆或亞克隆至不同酶切位點(diǎn)。

      3、 以此重組質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)化表達(dá)宿主菌的感受態(tài)細(xì)胞。

      (四)誘導(dǎo)表達(dá)

      1、挑取含重組質(zhì)粒的菌體單斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃過夜培養(yǎng)。

      2、按1∶50比例稀釋過夜菌,一般將1ml菌加入到含50mlLB培養(yǎng)基的300ml培養(yǎng)瓶中, 37℃震蕩培養(yǎng)至OD600≌0.4-1.0(*0.6,大約需3hr)。

      3、取部分液體作為未誘導(dǎo)的對(duì)照組,余下的加入IPTG誘導(dǎo)劑至終濃度0.4mM作為實(shí)驗(yàn)組,兩組繼續(xù)37℃震蕩培養(yǎng)3hr。

      4、分別取菌體1ml, 離心12000g×30s收獲沉淀,用100μl 1%SDS重懸,混勻, 70℃10min。

      5、離心12000g×1min,取上清作為樣品,可做SDS-PAGE等分析。

      公司正在出售的產(chǎn)品:

      ADAMTS7 peptide/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記整合素樣金屬蛋白酶與1-7抗原 1mgADAMTS7 peptide/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記整合素樣金屬蛋白酶與1-7抗原

      FCGR2A Protein Human 重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 His, His & AVI 標(biāo)簽)

      FCGR2重組小鼠 CD32 / FCGR2B 蛋白 (His & AVI 標(biāo)簽), Biotinylated Protein

      CD14 Protein Rat 重組大鼠 CD14 蛋白

      TFAP2C重組人 TFAP2C / AP2-GAMMA 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

      小鼠干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長(zhǎng)因子(SCF/MGF)ELISA 試劑盒

      Human aquaporin 2 (AQP-2) ELISA Kit 人水通道蛋白2(AQP-2)檢測(cè)試劑盒

      Humancholesterolesteransferprotein,CETPELISAKit 人酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口分裝

      Humanapelin13,AP13檢測(cè)試劑盒人apelin13(AP13)檢測(cè)試劑盒

      植物氧化應(yīng)激活性氧(ROS)熒光測(cè)定試劑盒(次氯酸離子)20

      Humaotalprostatespecificaigen,tPSAELISAKit人總前列腺特異抗原(tPSA)檢測(cè)試劑盒

      小鼠Ⅰ型膠原C端肽檢測(cè)試劑盒   小鼠Ⅰ型膠原C端肽試劑盒   規(guī)格型號(hào):96T/48T   小鼠Ⅰ型膠原C端肽試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:檢測(cè)試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠Ⅰ型膠原C端肽試劑盒、小鼠Ⅰ型膠原C端肽eisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個(gè)月。

      小鼠8異前列腺素檢測(cè)試劑盒   小鼠8異前列腺素試劑盒   規(guī)格型號(hào):96T/48T   小鼠8異前列腺素試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:檢測(cè)試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠8異前列腺素試劑盒、小鼠8異前列腺動(dòng)?動(dòng)

      大鼠髓細(xì)胞觸發(fā)受體1(EM1)檢測(cè)試劑盒 ,英文名: EM1 ELISA Kit

      Mouse glycogen phosphorylase BB (GP-BB) ELISA Kit 小鼠糖原0酸化酶同工酶BB(GP-BB)檢測(cè)試劑盒

      ratprolactin,PRLELISAKit 大鼠催乳素(PRL)檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口分裝

      CLIAKitforHIV(Humanai-immunodeficiencyvirusaibody)ELISAKit人抗人類免疫缺陷病毒抗體

      細(xì)胞PYK2激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20

      ELISAKit5-HT大鼠5羥色胺

      線粒體分離提取試劑盒(細(xì)胞樣品)S100A9重組小鼠 S100A9 / CAGB / p14 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

      0酸核糖基轉(zhuǎn)移酶1(HPRT1)重組蛋白 Recombinant Hypoxanthine Phosphoribosyltransferase 1 (HPRT1)

      ALOX15B重組人 ALOX15B / 15 Lipoxygenase 2 蛋白 Protein

      FCGR2A Protein Human 重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 His, His & AVI 標(biāo)簽)

      IFNAR1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IFNAR1 / IFNAR 蛋白 (His 標(biāo)簽)


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