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      產品名稱:支原體通用LAMP試劑盒

      產品特點:支原體通用LAMP試劑盒上海一研生物相關產品:亞鐵鉀:422.39Potassium ferrocyanide:14459-95-1 K4FeC6N6·3H2O

      硫酸鉀:97.18Potassium thiocyanate:333-20-0 KSCN

      產品型號:50次

      更新日期:2021-02-20

      訪問次數:656

      50次支原體通用LAMP試劑盒的詳細資料:

      參數規格:

      產品名稱

      支原體通用LAMP試劑盒

      英文名稱

       Universal lamp kit for Mycoplasma

      規格

      50次

      儲存條件:
      僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
      1. 血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
      2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。
      3. 細胞上清液:3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
      4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。
      5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
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      使用方法:
      一、樣品 DNA 的制備
      用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
      二、制備 Cps 標準曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
      1. 標記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
      2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
      3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
      4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
      5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
      6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
      7. NC 管中不加任何陽性對照。
      8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數值為橫軸,繪制標準曲線。 
      檢測步驟:
      一、 試劑的準備
      從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
      設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
      試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
      熒光PCR反應液 14µL N×14µL
      酶混合物 1 µL N×1 µL
      總量 15 µL N×15µL
      1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
      7.2 qPCR反應條件
      將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
      循環條件:
      1循環 50℃ for 2 min
      預變性 1循環 95℃ for 10 min
      PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
      60℃ for 60 sec
      60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。

      8-甲喹啉:143.198- methyl group:611-32-5 C10H9N

      4,4'-二-2,2'-聯吡:186.224,4'- two amino -2,2'-:18511-69-8 C10H10N4

      2-乙氧-3-吡:249.052- -3- and:766557-60-2 C7H8INO

      2--4-甲嘧:109.132- amino -4-:108-52-1 C5H7N3

      7-氟-6-硝-4-羥喹唑啉:209.137- -6- nitro -4- nitro group:162012-69-3 C8H4FN3O3

      偶氮胭脂紅GAzo rouge red G:579.58 C28H18N3NaO6S2:25641-18-3

      5-溴喹啉:208.065- bromide:4964-71-0 C9H6BrN

      亞鐵鉀:422.39Potassium ferrocyanide:14459-95-1 K4FeC6N6·3H2O

      硫酸鉀:97.18Potassium thiocyanate:333-20-0 KSCN

      支原體通用LAMP試劑盒 IL10RB / CRFB4 ELISA配對抗體

      甲型流感 H10N3 (A/duck/Hong Kong/786/1979) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (密碼子優化)(表達載體)

      PLVAP 基因全長ORF克隆

      YARS 基因全長ORF克隆

      VEGFR2 / Flk-1 / CD309 / KDR 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

      大鼠 AIFM2 基因全長ORF克隆

      食蟹猴 CDH17 基因全長ORF克隆

      Integrin alpha5 / CD49e 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽

      SEMA6A 基因全長ORF克隆

      小鼠 RIPK1 基因全長ORF克隆

      PFKFB3 基因全長ORF克隆

      ASB1 基因全長ORF克隆

       

       

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