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      產品名稱:貓血支原體LAMP試劑盒

      產品特點:貓血支原體LAMP試劑盒上海一研生物相關產品:3,4-二氯三氟甲:2153,4- two CL three:328-84-7 C7H3Cl2F3

      二脲:242.28Two phenyl urea:140-22-7 C13H14N4O; C6H5NHNHCONH

      1,4-雙(二氟甲):178.121,4- bis (two f) benzene:369-54-0 C8H6

      產品型號:50次

      更新日期:2021-02-20

      訪問次數:532

      50次貓血支原體LAMP試劑盒的詳細資料:

      使用方法:
      一、樣品 DNA 的制備
      用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
      二、制備 Cps 標準曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
      1. 標記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
      2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
      3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
      4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
      5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
      6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
      7. NC 管中不加任何陽性對照。
      8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數值為橫軸,繪制標準曲線。

      參數規格:

      產品名稱

      貓血支原體LAMP試劑盒

      英文名稱

       Lamp kit for Mycoplasma felis

      規格

      50次

      儲存條件:
      僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
      1. 血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
      2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。
      3. 細胞上清液:3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
      4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。
      5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
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      檢測步驟:
      一、 試劑的準備
      從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
      設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
      試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
      熒光PCR反應液 14µL N×14µL
      酶混合物 1 µL N×1 µL
      總量 15 µL N×15µL
      1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
      7.2 qPCR反應條件
      將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
      循環條件:
      1循環 50℃ for 2 min
      預變性 1循環 95℃ for 10 min
      PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
      60℃ for 60 sec
      60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。

      5-溴-3-吡甲:188.025- -3- pyridine methanol:37669-64-0 C6H6BrNO

      2,4,6-三嘧:125.132,4,6- three:1004-38-2 C4H7N5

      3-甲戊烷3- methyl pentane:86.18 C6H14:96-14-0

      全氟辛磺酸鉀:538.22Perfluorooctanesulfonic acid potassium:2795-39-3 C8F17KO3S

      聚對二甲:Parylene:

      3,4-二氯三氟甲:2153,4- two CL three:328-84-7 C7H3Cl2F3

      二脲:242.28Two phenyl urea:140-22-7 C13H14N4O; C6H5NHNHCONH

      1,4-雙(二氟甲):178.121,4- bis (two f) benzene:369-54-0 C8H6F4

      2,4-二-6-羥嘧:126.122,4- two hydroxy -6-:20610 C4H6N4O

      貓血支原體LAMP試劑盒 TMSB4X 基因全長ORF克隆

      小鼠 EGF / Epidermal Growth Factor 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

      STXBP3 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽

      Semaphorin-6A / SEMA6A 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

      IL1R3 / IL1RAP 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

      CD200 / OX-2 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

      E-Selectin / CD62e / SELE ELISA配對抗體

      ErbB3 / HER3 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

      大鼠 CLEC4A3 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

      SH2D4A 基因全長ORF克隆

      大鼠 HSP90AB1 基因全長ORF克隆

      KIAA0391 基因全長ORF克隆

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