小鼠雜交瘤細(xì)胞；Akt3保存在運(yùn)輸?shù)倪^程中，細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細(xì)胞有可能從瓶壁中脫落下來，因此客戶在收到貨以后的*時(shí)間是要先觀察產(chǎn)品的狀況，顯微鏡下觀察會出現(xiàn)細(xì)胞懸浮的情況，出現(xiàn)此狀態(tài)時(shí)，請不要立即打開培養(yǎng)瓶，應(yīng)立即將培養(yǎng)瓶置于細(xì)胞培養(yǎng)箱過夜，并于次日在顯微鏡下觀察，此時(shí)多數(shù)細(xì)胞會重新貼附于瓶壁。如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞仍不能貼壁，請?jiān)囍门_盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力，如臺盼藍(lán)染色證實(shí)細(xì)胞活力正常請按懸浮細(xì)胞的方法處理；如若證實(shí)細(xì)胞無活力，請?jiān)谑盏截浐?8小時(shí)內(nèi)將細(xì)胞狀態(tài)反饋給我公司，我們將盡快幫助解決。

細(xì)胞名稱  小鼠雜交瘤細(xì)胞；Akt3保存
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣

生長特性 半貼壁生長

特征特性 細(xì)胞注射小鼠腹腔可產(chǎn)生高滴度的單抗，可用于基礎(chǔ)研究和臨床檢驗(yàn)。

培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS

傳代方法 1：

3傳代,2-3天傳一代  

傳代情況 C10

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．小鼠雜交瘤細(xì)胞；Akt3保存培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。
注意事項(xiàng)：
1.收到小鼠雜交瘤細(xì)胞；Akt3保存后，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請立即與我們聯(lián)絡(luò)。
2.收到細(xì)胞先不開瓶蓋，瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)（視細(xì)胞密度而定）穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收細(xì)胞時(shí)就整體外觀拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài)，100*，200*各一張），觀察記錄細(xì)胞在運(yùn)輸過程中是否有污染情況。作為我方進(jìn)行銷售依據(jù)。
3.由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運(yùn)輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊懀时竟局槐ＷC客戶收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài)，故客戶需要售后時(shí)需出示收到細(xì)胞的時(shí)間證明及客戶提供收貨時(shí)間和發(fā)現(xiàn)問題后客服人員溝通的時(shí)間證明，期間間隔時(shí)間不能大于7天。
4.所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內(nèi)操作，并請注意防護(hù)，所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
本公司代理ATCC細(xì)胞，提供小鼠雜交瘤細(xì)胞；Akt3保存售前售后一條龍服務(wù)，若要獲取詳細(xì)的說明書或價(jià)格信息，點(diǎn)擊了解更多小鼠源細(xì)胞。
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質(zhì)量規(guī)格：>98%，BCAfatinibdimaleate/BIBW2992-MA2阿法替尼雙馬來酸鹽

質(zhì)量規(guī)格：>99%,BPAphidicolinfromNigrosporaoryzae阿非迪霉素；艾菲地可寧

質(zhì)量規(guī)格：>98%，BRAgomelatine阿戈美拉汀（II型）

質(zhì)量規(guī)格：BRAgomelatine阿戈美拉汀（I型）

質(zhì)量規(guī)格：>99%,BCAlogliptin(SYR-322)阿格列汀;阿洛利停

質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRArgatroban

質(zhì)量規(guī)格：BRArgatroban（標(biāo)準(zhǔn)品）

質(zhì)量規(guī)格：>98%，分子生物學(xué)級Acarbose

pYES2NT/CShikimicAcid30次

pYES3ShrimpAlkalinePhosphatase30次

pYES3CTSH-SY5Y30次

pYES3NT/BSHZ-8830次

pYES4NT/CSiHa30次

pYES6/CTSilicaGel30次

pYFPSilicaSpinColumnforMiniprep30次

pYFP-GogiSilicaSpinColumnMaxiprep30次

pYFPlac112SilverNitrate30次

pYFPlac181SilverStainErasol30次

pYFPlac195SinapicAcid30次

pYIP211SingleCellLysisSolution30次

pYFP-MembraneSingleCellLysisSolution30次

pYFP-TublinSingleCellRNAAmplificationKit30次

pBC1SingleCellSuspensionSolution30次
小鼠雜交瘤細(xì)胞；Akt3保存CHCHD8  卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白CHCHD8多克隆抗體     0.2ml

CHD3  ATP依賴的解旋酶CHD3多克隆抗體     0.2ml

CHDH/Choline dehydrogenase  脫氫酶多克隆抗體     0.2ml

Chemerin/TIG2  受體應(yīng)答蛋白2多克隆抗體     0.1ml

CHFR  泛素連接酶蛋白CHFR多克隆抗體     0.2ml

Chicken IgY  兔抗雞IgY多克隆抗體     1mg

CHK1/CHEK1  細(xì)胞周期檢測點(diǎn)激酶1多克隆抗體     0.2ml

CHK2  細(xì)胞周期檢測點(diǎn)激酶2多克隆抗體     0.1ml

CHKL/Ethanolamine kinase beta  激酶β多克隆抗體     0.2ml

CHL1/CALL  神經(jīng)細(xì)胞粘附分子CALL多克隆抗體     0.2ml

Chloramphenicol  多克隆抗體     0.2ml

Chloramphenicol  多克隆抗體     0.2ml