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      產品名稱:小鼠黑色素瘤細胞;B16-F0保存

      產品特點:了解更多小鼠黑色素瘤細胞;B16-F0保存,相關資料如:說明書、培養條件、注意事項及售后可咨詢我們在線客服。收到細胞后請盡快更換為含10% FBS的新鮮培養基,不建議使用原瓶中運輸用培養基。

      產品型號:

      更新日期:2019-01-31

      訪問次數:536

      小鼠黑色素瘤細胞;B16-F0保存的詳細資料:


      本公司代理ATCC細胞,提供小鼠黑色素瘤細胞;B16-F0保存售前售后一條龍服務,若要獲取詳細的說明書或價格信息,點擊了解更多小鼠源細胞
      細胞名稱  小鼠黑色素瘤細胞;B16-F0保存
      形態特性 上皮細胞樣

      生長特性 貼壁生長

      特征特性 B16-Fo是一株小鼠黑絲素瘤細胞系。它可在體外常規傳代培養,產生高濃度的黑色素。可用于分子生物學中黑色素基因的表達研究。

      培養條件 DMEM-H:

      Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS  

      傳代方法 1:

      3傳代,2-3天傳一代  

      傳代情況 C24

      凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS

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      小鼠黑色素瘤細胞;B16-F0保存在運輸的過程中,細胞培養瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來,因此客戶在收到貨以后的*時間是要先觀察產品的狀況,顯微鏡下觀察會出現細胞懸浮的情況,出現此狀態時,請不要立即打開培養瓶,應立即將培養瓶置于細胞培養箱過夜,并于次日在顯微鏡下觀察,此時多數細胞會重新貼附于瓶壁。如果發現細胞仍不能貼壁,請試著用臺盼藍染色法鑒定細胞活力,如臺盼藍染色證實細胞活力正常請按懸浮細胞的方法處理;如若證實細胞無活力,請在收到貨后48小時內將細胞狀態反饋給我公司,我們將盡快幫助解決。
      細胞培養步驟:
      一.小鼠黑色素瘤細胞;B16-F0保存培養基及培養凍存條件準備:
      1)準備MEM培養基(MEM:GIBCO,貨號11095-080),85%;北美胎牛血清(United States,GIBCO,貨號16000-044),15%。
      2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
      3)凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
      二.細胞處理:
      1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
      2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
      對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
      1.棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
      2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
      3.按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
      4.將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
      3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。
      注意事項:
      1.收到小鼠黑色素瘤細胞;B16-F0保存后,若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯絡。
      2.收到細胞先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養箱靜置2-4小時(視細胞密度而定)穩定細胞狀態。接著在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收細胞時就整體外觀拍一張照片,觀察培養基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細胞狀態,100*,200*各一張),觀察記錄細胞在運輸過程中是否有污染情況。作為我方進行銷售依據。
      3.由于細胞狀態受環境、操作和運輸等多方面因素影響,故本公司只保證客戶收到細胞后一周內的細胞狀態,故客戶需要售后時需出示收到細胞的時間證明及客戶提供收貨時間和發現問題后客服人員溝通的時間證明,期間間隔時間不能大于7天。
      4.所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
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      質量規格:分子生物學級N-Stearoyldihydro-D-erythro-SphingosineN-十八烷酰二氫-D-赤-鞘氨醇

      質量規格:BR,UV>30%N-tert-Butyl-α-phenylnitroneN-叔丁基-α-苯基硝酮(>98.0%(HPLC)(T))

      質量規格:BRBOC-L-MethionineN-叔丁氧羰基-L-

      質量規格:>98%,BRBoc-Asn-(Xan)-OHN-叔丁氧羰基-N'-氧蒽基-L-天

      質量規格:分子生物學級Boc-O-(2-bromo-Cbz)-L-TyrosineN-叔丁氧羰基-O-(2-溴芐氧羰基)-L-

      質量規格:38000~42000mpa.sN6-Cbz-L-LysineN-碳芐氧基賴氨酸,N6-Cbz-L-賴氨酸

      質量規格:>99%,BRFmoc-Lys(Z)-OHN'-芴甲氧羰基-N-芐氧羰基-L-賴氨酸

      質量規格:>99%,5NN'-Nitro-D-arginineN'-硝基-D-

      pKD1pRC250g

      pKH3pRC/CMV250g

      pKJE7PrecipitatedTMBChromogenicKit250g

      pKK223-3批次1PrehybridizationSolutionsinSSC250g

      pKK232-8PrehybridizationSolutionsinSSPE250g

      pKK233-3PremixedAcr-BisPowder250g

      pKLAC1PremixedAcr-BisPowder250g

      pLacZPremixedBCIP/NBTSolution250g

      pLAMBLA1305.2PreScissiomProtease250g

      pLAPSNPrestainedProteinMarker250g

      pLEGFP-C1PrestainedProteinMarker250g

      pLEGFP-N1pRetro-Off250g

      pAdTrackpRetro-On250g

      pLEGFP-N2pRetro-on-EGFP250g

      pLentG-KOSMpRetro-on-RFP250g
      小鼠黑色素瘤細胞;B16-F0保存Caspase 2  半胱胺酸蛋白酶-2多克隆抗體     0.1ml

      Caspase 4  半胱胺酸蛋白酶蛋白-4多克隆抗體     0.1ml

      Caspase 4/Caspase 11  半胱胺酸蛋白酶4/11多克隆抗體     0.2ml

      Caspase 5  半胱胺酸蛋白酶蛋白5多克隆抗體     0.1ml

      Caspase 8  半蛋白酶8多克隆抗體     0.1ml

      Caspase-1(actived P10)  天冬氨酸-特異性蛋白酶家族多克隆抗體     0.1ml

      Caspase-10  半胱胺酸蛋白酶-10多克隆抗體     0.1ml

      Caspase-12  半胱胺酸蛋白酶蛋白-12多克隆抗體     0.1ml

      Caspase-12  半胱胺酸蛋白酶蛋白-12多克隆抗體     0.1ml

      Caspase-13/4  半胱胺酸蛋白酶蛋白-13多克隆抗體     0.2ml

      caspase-3 p11  半胱天冬酶-3酶原多克隆抗體     0.1ml

      caspase-3 p12 subunit  活化半胱胺酸蛋白酶蛋白-3多克隆抗體     0.1ml

       

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