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      產品名稱:杜氏利什曼蟲(黑熱病病原蟲)LAMP試劑盒

      產品特點:杜氏利什曼蟲(黑熱病病原蟲)LAMP試劑盒上海一研生物相關產品:1,2-雙(二膦)分子式:446.46英稱:1,2- bis (two phenyl) benzeneC號:13991-08-7分子量: C30H24P2

      2-溴-3-三氟甲吡分子式:226英稱:2- three -3-:175205-82-0分子量: C6H3BrF3N

      天青I英文名稱:Azure I分子式:

      產品型號:50次

      更新日期:2021-02-20

      訪問次數:541

      50次杜氏利什曼蟲(黑熱病病原蟲)LAMP試劑盒的詳細資料:

      參數規格:

      產品名稱

      杜氏利什曼蟲(黑熱病病原蟲)LAMP試劑盒

      英文名稱

       Lamp kit for Leishmania donovani

      規格

      50次

      儲存條件:
      僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
      1. 血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
      2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。
      3. 細胞上清液:3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
      4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。
      5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
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      使用方法:
      一、樣品 DNA 的制備
      用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
      二、制備 Cps 標準曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
      1. 標記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
      2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
      3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
      4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
      5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
      6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
      7. NC 管中不加任何陽性對照。
      8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數值為橫軸,繪制標準曲線。 
      檢測步驟:
      一、 試劑的準備
      從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
      設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
      試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
      熒光PCR反應液 14µL N×14µL
      酶混合物 1 µL N×1 µL
      總量 15 µL N×15µL
      1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
      7.2 qPCR反應條件
      將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
      循環條件:
      1循環 50℃ for 2 min
      預變性 1循環 95℃ for 10 min
      PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
      60℃ for 60 sec
      60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。

      3,4,7,8-四甲-1,10-菲羅啉分子式:236.32英文名稱:3,4,7,8- four methyl -1,10-:1660-93-1分子量: C16H16N2

      二氯(1,10-菲咯啉)銅分子式:314.66英文名稱:二氯(1,10 -菲咯啉)銅:14783-09-6分子量: C12H8Cl2CuN2

      牛磺雄去氧膽英文名稱:Niu Huangxiong deoxycholic acid分子式:499.7分子量:C26H45NO6S:14605-22-2

      5-氯-8-羥喹啉分子式:179.6英文名稱:5- -8- hydroxy group:130-16-5分子量: C9H6ClNO

      1,2-雙(二膦)分子式:446.46英文名稱:1,2- bis (two phenyl) benzene:13991-08-7分子量: C30H24P2

      2-溴-3-三氟甲吡分子式:226英文名稱:2- three -3-:175205-82-0分子量: C6H3BrF3N

      天青I英文名稱:Azure I分子式:305.83分子量: C15H16ClN3S:531-55-5

      碳酸錳分子式:114.94英文名稱:Manganese carbonate:598-62-9分子量: MnCO3

      吉拉爾特試劑T英文名稱:Giralt reagent T分子式:167.64分子量: C5H14ClN3O:123-46-6

      杜氏利什曼蟲(黑熱病病原蟲)LAMP試劑盒甲型流感 H7N7 (A/Netherlands/219/2003) Matrix protein 1 / M1 基因全長ORF克隆 (密碼子優化)(表達載體), 無標簽

      BMP-2 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶HA標簽

      小鼠 GLIPR1 基因全長ORF克隆

      重組狗 ANGPTL7 / Angiopoietin-like 7 蛋白 (His 標簽)

      F13A1 基因全長ORF克隆

      小鼠 Carbonic Anhydrase VIII / Car8 ELISA配對抗體

      小鼠 ALK-3 / BMPR1A 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

      BTG1 基因全長ORF克隆

      MTHFR 基因全長ORF克隆

      JTB 基因全長ORF克隆

      大鼠 VPS36 基因全長ORF克隆

      HFE2 / RGM-C 轉錄變體a 基因全長ORF克隆

       

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