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      產(chǎn)品名稱:納米小孢子菌LAMP試劑盒

      產(chǎn)品特點(diǎn):納米小孢子菌LAMP試劑盒上海一研生物相關(guān)產(chǎn)品:-溴)-分子式:240.14英文名稱:4- (3- Bromophenyl) - piperidine:351534-36-6分子量: C11H14BrN

      苊英文名稱:Acenaphthene分子式:154.21分子量: C12H10:83-32-9

      茵芋苷英文名稱:Skimmin分

      產(chǎn)品型號:50次

      更新日期:2021-02-20

      訪問次數(shù):472

      50次納米小孢子菌LAMP試劑盒的詳細(xì)資料:

      參數(shù)規(guī)格:

      產(chǎn)品名稱

      納米小孢子菌LAMP試劑盒

      英文名稱

       Lamp kit for microsporidium nanoparticles

      規(guī)格

      50次

      儲存條件:
      僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
      1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
      2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
      3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
      4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
      5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
      ?
      使用方法:
      一、樣品 DNA 的制備
      用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
      二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
      1. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
      2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
      3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
      4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
      5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
      6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
      7. NC 管中不加任何陽性對照。
      8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。 
      檢測步驟:
      一、 試劑的準(zhǔn)備
      從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
      設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應(yīng)體系配制如下表:
      試劑 每個反應(yīng)加入的量 N個反應(yīng)加入的量
      熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
      酶混合物 1 µL N×1 µL
      總量 15 µL N×15µL
      1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
      7.2 qPCR反應(yīng)條件
      將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
      循環(huán)條件:
      1循環(huán) 50℃ for 2 min
      預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
      PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
      60℃ for 60 sec
      60℃延伸時收集熒光信號。報告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請勿選擇ROX參比熒光。

      4,4-聯(lián)吡分子式:156.18英文名稱:4,4- Union:553-26-4分子量: C10H8N2

      4-(3-溴)-分子式:240.14英文名稱:4- (3- Bromophenyl) - piperidine:351534-36-6分子量: C11H14BrN

      苊英文名稱:Acenaphthene分子式:154.21分子量: C12H10:83-32-9

      茵芋苷英文名稱:Skimmin分子式:324.28274分子量:C15H16O8:93-39-0

      伊紅次甲蘭英文名稱:Red methylene blue分子式:分子量::

      對丁溴分子式:213.11英文名稱:For butylbenzene:41492-05-1分子量: C10H13Br

      (1-丁-3-甲咪唑)分子式:174.67英文名稱:Chlorination (1- butyl -3- methyl group):79917-90-1分子量: C8H15ClN2

      克菌丹英文名稱:Captan分子式:330.6分子量: C9H8NSO2Cl3:133-06-2

      (S)-(+)-2-甲分子式:99.17英文名稱:(S) - (+) -2- methyl piperidine:3197-42-0分子量: C6H13N

      納米小孢子菌LAMP試劑盒 AMPH 基因全長ORF克隆

      PLS3 基因全長ORF克隆

      甲型流感 H7N9 (A/Anhui/1/2013) 核蛋白 (Nucleoprotein / NP) 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體, 密碼子優(yōu)化), 無標(biāo)簽

      HOXB5 基因全長ORF克隆

      ANXA8L2 基因全長ORF克隆

      CRABP2 基因全長ORF克隆

      ODAM 基因全長ORF克隆

      大鼠 SMNDC1 基因全長ORF克隆

      C3orf58 基因全長ORF克隆

      CSGALNACT2 基因全長ORF克隆

      重組人 Oncostatin M / OSM 蛋白 (His 標(biāo)簽)

      CKS2 基因全長ORF克隆

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