cTnI DRGelisa試劑盒說明書服務(wù)承諾：
一、質(zhì)量保證,有問題免費包換；
二、提供免費代測服務(wù)（為客戶提供來樣檢測服務(wù),zui大限度實驗結(jié)果的有效性）；
三、提供全程技術(shù)指導(dǎo)。

人肌鈣蛋白I（cTnI）DRGelisa試劑盒 Human cTnI ELISA Kit
cTnI DRGelisa試劑盒說明書【實驗用途】CTnI肌鈣蛋白I，TnI是肌肉舒縮的分子開關(guān)，當胞漿內(nèi)鈣離子濃度較低時，TnI的抑制區(qū)域（C末端12個氨基酸；cTnI137-148）與肌動-原肌球蛋白緊密結(jié)合，橫橋三磷酸腺苷酶（ATPase）失活，細肌絲被關(guān)閉，肌肉處于舒張狀態(tài)。當鈣離子濃度升高到一定程度時， TnC與鈣離子結(jié)合，導(dǎo)致其構(gòu)型發(fā)生改變，并將此效應(yīng)傳遞到肌鈣蛋白，TnI的構(gòu)型隨之發(fā)生改變，與肌動-原肌球蛋白脫離，抑制作用被解除，橫橋ATPase被激活，細肌絲發(fā)生滑動，肌肉表現(xiàn)出收縮性。所提供的ELISA Kit是典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒（ELISA）。預(yù)先包被的抗體為多克隆抗體。檢測相抗體也為多克隆抗體，經(jīng)（biotin）標記。樣品和標記抗體先后加入酶標板孔反應(yīng)后，PBS或TBS洗滌。隨后加入過氧化物酶標記的親和素反應(yīng)；經(jīng)過PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測因子呈正相關(guān)。
試劑盒組成及試劑配制 ：
1.cTnI DRGelisa試劑盒說明書 酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔）。 
2. 標準品（Standard）：2瓶（凍干品）。
3. 樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶
4. 標記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5. 辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6. 標記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7. 辣根過氧化物酶標記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8. 底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。 
9. 濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。 
10. 終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
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操作流程：
（1）cTnI DRGelisa試劑盒說明書待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個平行孔；設(shè)兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細胞裂解液100μl；另設(shè)一個空白對照孔，加入純細胞裂解液100μl。 
（2）酶標板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。
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