① 組織塊培養(yǎng)法

組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。

② 消化培養(yǎng)法

③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

對于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

④器官培養(yǎng)

器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

產(chǎn)品名稱：兔纖維環(huán)細(xì)胞

英文名稱：Rabbit annulus fibrosus cell

組織來源：椎間盤組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

細(xì)胞簡介：

纖維環(huán)，位于椎間盤的周緣部，由纖維軟骨組成，纖維環(huán)的纖維在椎體間斜行，在橫切面上排列成同心環(huán)狀，相鄰環(huán)的纖維具有相反的斜度，而相互交叉。纖維環(huán)細(xì)胞位于膠原纖維束之前，合成和分泌纖維環(huán)細(xì)胞外基質(zhì)，維持正常的纖維環(huán)結(jié)構(gòu)和功能。

細(xì)胞特性：

1）組織來源于實驗動物的正常椎間盤組織。

2)細(xì)胞鑒定：Ⅱ型膠原(Collagen Ⅱ)或Ⅰ型膠原(Collagen Ⅰ)熒光染色為陽性。

3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。

5)細(xì)胞生長方式：多角形細(xì)胞，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。

推薦培養(yǎng)基：

我們推薦使用 DELF 原代 軟骨 細(xì) 胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。

取材→分離→培養(yǎng)和維持

1、取材

人和動物細(xì)胞的取材是原代細(xì)胞培養(yǎng)成功的首要條件，直接影響細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應(yīng)嚴(yán)格無菌

③ 防止機械損傷

④ 去除無用組織和避免干燥

⑤ 應(yīng)注意組織類型、分化程度、年齡等

⑥ 作好記錄

2、分離

人或動物體內(nèi)(或胚胎組織)由于多種細(xì)胞結(jié)合緊密，不利于各個細(xì)胞在體外培養(yǎng)中生長繁殖，必須將現(xiàn)有的組織塊充分散開，使細(xì)胞解離出來。

(1)懸浮細(xì)胞的分離方法

組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細(xì)胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細(xì)胞。

(2)實體組織材料的分離方法

對于實體組織材料，由于細(xì)胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細(xì)胞充分分散，形成細(xì)胞懸液，可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法。

① 機械分散法

特點:簡便、快速,但對組織機械損傷大，而且細(xì)胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀)，應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進一步使細(xì)胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動，使團塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時再采用機械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細(xì)胞團塊得以較充分的分散，制成少量細(xì)胞群團和大量單個細(xì)胞的細(xì)胞懸液，接種培養(yǎng)后，細(xì)胞容易貼壁生長。

大鼠無翅型MMTV整合位點家族成員3A(W3A)檢測試劑盒 ，英文名： W3A ELISA Kit

Mouse eosinophil chemotactic factor (ECF) ELISA Kit 小鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化因子(ECF)檢測試劑盒

Mouseplatelet-derivedgrowthfactor-BB,PDGF-BBELISAKit 小鼠血小板衍生生長因子BB(PDGF-BB)檢測試劑盒 進口分裝

CLIAKitforHSPgp96(HumanHeatShockProteinglycoprotein96)ELISAKit人熱休克蛋白糖蛋白96

細(xì)胞MUSK激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKitIL-鼠白介素10

IFNAR1重組食蟹猴 IFNAR1 / IFNAR 蛋白  Protein

Insulin Receptor- Beta(ISR- Beta 0.5mgInsulin Receptor- Beta(ISR- Beta) 胰島素受體-β(抗原)

ERN1重組人 ERN1 / IRE1 蛋白 (aa 465-977, His & GST 標(biāo)簽) Protein

FGF6 Protein Human 重組人 FGF6 / FGF-6 蛋白

SMPD1 Protein Mouse 重組小鼠 SMPD1 / ASM 蛋白 (His 標(biāo)簽)

Insulin Receptor- Beta(ISR- Beta 0.5mgInsulin Receptor- Beta(ISR- Beta) 胰島素受體-β(抗原)

FGF6 Protein Human 重組人 FGF6 / FGF-6 蛋白

IFNAR1重組食蟹猴 IFNAR1 / IFNAR 蛋白  Protein

SMPD1 Protein Mouse 重組小鼠 SMPD1 / ASM 蛋白 (His 標(biāo)簽)

ERN1重組人 ERN1 / IRE1 蛋白 (aa 465-977, His & GST 標(biāo)簽) Protein

小鼠蛋白激酶A(PKA)ELISA 試劑盒

Human placeal protein (PP) ELISA Kit 人胎盤蛋白(PP)檢測試劑盒

HumanProAialNaiureticPeptide,Pro-ANPELISAKit 人前心肽(Pro-ANP)檢測試劑盒 進口分裝

Humanaialnaiureticfactor,ANF檢測試劑盒人心納素(ANF)檢測試劑盒

植物源性食品櫻桃(cherry)試劑盒20次

Humahrombospondin1，TSP-1ELISAKit人血小板反應(yīng)蛋白/敏感蛋白1(TSP-1)檢測試劑盒

兔纖維環(huán)細(xì)胞B2/核黃素   英文名稱：   Human Vitamin B2   規(guī)格：      英文縮寫：   VB2

血管性血友病因子裂解酶   英文名稱：   von Willebrand factor-clea-ving protease   規(guī)格：      英文縮寫：   vWF-cp /ADAMTS13

氧化酶   英文名稱：   Human Xahione oxidase   規(guī)格：      英文縮寫：   XOD

壞死因子β   英文名稱：   Rat Tumor Necrosis Factor β   規(guī)格：      英文縮寫：   TNF  β

視天氣狀況和運輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。

1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。

T-25培養(yǎng)瓶充滿培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。

本公司的所有產(chǎn)品僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)科研等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用