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      小鼠α2抗纖溶酶(α2-AP)elisa檢測試劑盒操作步驟
      點擊次數:742 更新時間:2021-09-27

      小鼠α2抗纖溶酶(α2-AP)elisa檢測試劑盒操作步驟:


      1. 標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔,在di一、第二孔中分別加標準品100μl,然后在di一、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。

      2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

      3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

      4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。

      5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。

      6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。

      7. 溫育:操作同3。

      8. 洗滌:操作同5。

      9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

      10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。

      11. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘。

      人乳腺癌細胞;MDA-MB-231

      人乳腺癌細胞;MDA-MB-435S

      人乳腺癌細胞;MDA-MB-453

      人惡性多發性畸胎瘤細胞;NTERA-2

      人卵巢畸胎瘤細胞;PA-1

      人胰腺癌細胞;PANC-1

      人成骨肉瘤細胞;Saos-2

      人神經母細胞瘤細胞;SH-SY5Y

      人卵巢腺癌細胞;SK-OV-3

      人骨肉瘤細胞;U-2 OS [U2OS;U2-OS;U-2OS]

      人橫紋肌肉瘤細胞;A-204

      人肺腺癌細胞;Calu-3

      人腎癌Wilms細胞;G401

      人肝癌細胞;Hep G2 [HepG2]

      人急性早幼粒白血病細胞;HL-60

      人骨肉瘤細胞;HOS

      人慢性髓系白血病細胞;K562

      人前列腺癌細胞;LNCaP

      人乳腺癌細胞;MCF 7B

      人急性淋巴母細胞性白血病細胞;MOLT-4

      人小細胞肺癌細胞;NCI-H209

      黑人Burkitt淋巴瘤細胞;RAJI

      人B淋巴細胞瘤細胞;RAMOS

      人B淋巴細胞瘤細胞;RAMOS(RA.1)

      人腦瘤細胞;SF126

      人腦瘤細胞;SF763

      人腦瘤細胞;SF767

      人皮膚黑色素瘤細胞;SK-MEL-1

      人腎上腺皮質癌細胞;SW-13

      人結直腸癌細胞;T84

      人急性單核細胞白血病細胞;THP-1

      人神經膠質細胞瘤細胞;U251

      人組織細胞淋巴瘤細胞;U937 [U-937]

      人胃腺癌細胞;BGC-823

      人低分化肺腺癌細胞;GLC-82 [GLC82]

      人喉癌上皮細胞;Hep-2

      人纖維肉瘤細胞;HT-1080

      人絨癌細胞;JEG-3

      人耐VP16絨癌細胞株;JEG-3/VP16

      白介素-2轉染耐VP16絨癌細胞;JEG-3/VP16-IL-2

      TNFa轉染耐VP16絨癌細胞;JEG-3-VP16-TNFa

      人急性T淋巴細胞白血病細胞;Jurkat, Clone E6-1

      人神經母細胞瘤細胞;BE(2)-M17

      人乳腺癌細胞;MDA-MB-157

      人成骨肉瘤細胞;MG-63

      人小細胞肺癌細胞;NCI-H446

      人多發性骨髓瘤細胞;RPMI-8226 [RPMI8826]


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