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      無漿體通用PCR檢測試劑盒組成及試劑配制
      點擊次數:874 更新時間:2020-05-19

      無漿體通用PCR檢測試劑盒組成及試劑配制:

      1、酶標板:一塊(96孔)

      2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。

      3、 樣品稀釋液:1×20ml。

      4、 檢測稀釋液A:1×10ml。

      5、 檢測稀釋液B:1×10ml。

      PCR反應的特異性決定因素為:

      ①引物與模板DNA特異正確的結合;

      ②堿基配對原則;

      ③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;

      ④靶基因的特異性與保守性。

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