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      兔血管內皮細胞生長因子(VEGF)elisa試劑?操作步驟
      點擊次數:583 更新時間:2023-03-15

      兔血管內皮細胞生長因子(VEGF)elisa試劑操作步驟:

      1. 標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔,在di一、第二孔中分別加標準品100μl,然后在di一、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。

      2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

      3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

      4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。

      5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。

      6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。

      7. 溫育:操作同3。

      8. 洗滌:操作同5。

      9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

      10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。

      11. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘。

       柚皮素英文名稱:Naringenin480-41-1分子式:272.25278

       羽扇豆醇英文名稱:Lupeol545-47-1分子式:426.7174

       鳶尾苷元磺酸鈉英文名稱:Tectorigenin sodium sulfonate548-77-6分子式:300.26

      原花青素英文名稱:Primary anthocyanin4852-22-6分子式:594.52

       α-香附酮英文名稱:A-cyperone473-08-5分子式:218.33458

       槲皮苷英文名稱:Quercitrin522-12-3分子式:448.3769

       西貝堿英文名稱:Sipeimine61825-98-7分子式:429.64

       西紅花苷Ⅱ英文名稱:Crocin II55750-84-0分子式:814.82

       西紅花苷I英文名稱:Crocin I94238-00-3分子式:976.96456

       仙茅苷英文名稱:Cents a85643-19-2分子式:466.44

       相思豆堿 英文名稱:Acacia base21339-55-9分子式:218.25

       香蒲新苷英文名稱:Typhaneoside104472-68-6分子式:770.68528


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